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　　醫(yī)用清洗劑酶活力是衡量清洗劑中酶成分活性強弱的關鍵指標，具體指單位劑量清洗劑中的酶在規(guī)定實驗條件下，分解特定底物的速率或分解量，直接體現(xiàn)酶類成分對目標污垢的降解能力。酶作為醫(yī)用清洗劑的核心去污成分，活力不足會導致清洗劑無法有效分解醫(yī)療器械表面的有機污垢，即便后續(xù)滅菌處理也難以完全消除污染隱患，而通過醫(yī)用清洗劑酶活力檢測，既能幫助生產(chǎn)企業(yè)把控每一批次產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定性，及時發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)、儲存過程中酶活力衰減問題，也能為醫(yī)療機構提供客觀的產(chǎn)品選擇依據(jù)，保障復用醫(yī)療器械的清洗質(zhì)量，從源頭降低醫(yī)療安全風險。

　　醫(yī)用清洗劑酶活力檢測步驟詳解

　?。?）蛋白酶活力檢測（福林-酚法）

　　原理：蛋白酶催化酪蛋白水解生成含酚羥基的氨基酸，在堿性條件下與福林-酚試劑反應生成藍色化合物，通過分光光度計在680nm波長下測定吸光度，依據(jù)標準曲線計算酶活力。

　　關鍵步驟：

　　樣品預處理：將醫(yī)用清洗劑按1:100稀釋，制備酶液樣品；

　　反應體系：加入0.5mL酶液、1mL酪蛋白底物（10g/L），40℃水浴保溫10分鐘；

　　終止反應：加入2mL三氯乙酸溶液（0.4mol/L），靜置10分鐘后離心；

　　顯色與檢測：取上清液1mL，加入5mL碳酸鈉溶液（0.4mol/L）和1mL福林-酚試劑，40℃顯色20分鐘，測定吸光度。

　　結果判定：以每分鐘催化生成1μg酪氨酸所需的酶量為1個活力單位（U），計算樣品的酶活力值，需符合產(chǎn)品標注值的±10%范圍。

　?。?）脂肪酶活力檢測（滴定法）

　　原理：脂肪酶催化橄欖油水解生成脂肪酸，用氫氧化鈉標準溶液滴定脂肪酸，根據(jù)消耗的堿液體積計算酶活力。

　　關鍵步驟：

　　底物制備：將橄欖油與阿拉伯膠溶液按1:3比例混合，高速攪拌制成乳化液；

　　反應體系：加入5mL乳化底物、2mL酶液（1:50稀釋），40℃水浴保溫30分鐘；

　　終止與滴定：加入10mL乙醇-乙醚混合液（1:1）終止反應，滴加2滴酚酞指示劑，用0.05mol/L氫氧化鈉標準溶液滴定至粉紅色。

　　結果判定：以每分鐘催化生成1μmol脂肪酸所需的酶量為1個活力單位（U），樣品活力需≥產(chǎn)品標注值的90%。

　?。?）淀粉酶活力檢測（碘量法）

　　原理：淀粉酶催化淀粉水解生成麥芽糖，剩余淀粉與碘液反應生成藍色復合物，通過滴定剩余碘的量計算酶活力。

　　關鍵步驟：

　　反應體系：加入2mL淀粉底物（20g/L）、1mL酶液（1:200稀釋），40℃水浴保溫15分鐘；

　　終止反應：加入1mL鹽酸溶液（1mol/L），冷卻至室溫；

　　滴定：加入0.5mL碘液（0.1mol/L），用0.05mol/L硫代硫酸鈉標準溶液滴定至藍色褪去。

　　結果判定：以每分鐘催化1mg淀粉水解所需的酶量為1個活力單位（U），樣品活力需符合行業(yè)標準規(guī)定的最低限值（≥30U/mL）。